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產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國產(chǎn) |
品牌 | 上海莼試 |
貨號 | CS-X0316 |
保存條件 | 低溫冷藏 |
英文名稱 | 1 x 10^6 cells/T25培養(yǎng)瓶 |
保質(zhì)期 | 詳見說明書個(gè)月 |
產(chǎn)品名稱:小鼠胚胎干細(xì)胞,E14細(xì)胞圖片
規(guī)格 :1 x 10^6 cells/T25培養(yǎng)瓶
細(xì)胞特性
1)來源:小鼠,胚胎內(nèi)細(xì)胞團(tuán)
2)形態(tài):球形克隆
3)含量:>1x106 個(gè)/mL
4)污染:支原體、細(xì)菌、酵母和真菌檢測為陰性
5)規(guī)格:T25瓶或者1mL凍存管包裝
小鼠胚胎干細(xì)胞,E14細(xì)胞圖片細(xì)胞接受后的處理:
1)收到細(xì)胞后,請檢查是否漏液,如果漏液,請拍照片發(fā)給我們。
2)請先在顯微鏡下確認(rèn)細(xì)胞生長狀態(tài),去掉封口膜并將T25瓶置于37℃培養(yǎng)約2-3h。
3)棄去T25瓶中的培養(yǎng)基,添加6ml本公司附帶的完全培養(yǎng)基。
4)如果細(xì)胞長滿(90%以上)請及時(shí)進(jìn)行細(xì)胞傳代,傳代培養(yǎng)用6ml本公司附帶的完全培養(yǎng)基。
5)接到細(xì)胞次日,請檢查細(xì)胞是否污染,若發(fā)現(xiàn)污染或疑似污染,請及時(shí)與我們?nèi)〉寐?lián)系。
細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備DMEM培養(yǎng)基(DMEM,GIBCO,貨號11965-092),90%;胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲存。
二.細(xì)胞處理:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對于貼壁細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
1.棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。
2.加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加入3ml此細(xì)胞的培養(yǎng)基終止消化。
3.輕輕吹打后吸出,移入15ml離心管中,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)液后吹勻。
4.移入到事先準(zhǔn)備好的含有5ml培養(yǎng)基的T-25培養(yǎng)瓶中或含有14ml培養(yǎng)基的T-75培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)。
3)細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時(shí),可進(jìn)行細(xì)胞凍存。貼壁細(xì)胞凍存時(shí),先要消化處理并進(jìn)行細(xì)胞計(jì)數(shù)。消化方法按照細(xì)胞傳代方法的1-3步驟進(jìn)行,*的重懸液使用血清。懸浮細(xì)胞直接計(jì)數(shù)后離心,用血清重懸浮,加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻,按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中。本公司按每個(gè)凍存管細(xì)胞數(shù)目大于1X106個(gè)細(xì)胞凍存。
1.一般客戶拿到細(xì)胞后,應(yīng)該注意什么?
客戶收到細(xì)胞先不開蓋,放在培養(yǎng)箱靜置若干小時(shí)后(看細(xì)胞密度而定)在倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞生長情況,并對細(xì)胞進(jìn)行不同倍數(shù)拍照(建議受收細(xì)胞時(shí)的培養(yǎng)基拍一張照片,觀察培養(yǎng)基的顏色和是否有漏液情況,顯微鏡下拍細(xì)胞100X,200X各一張),排除細(xì)胞本身污染的情況;收到細(xì)胞未開封,出現(xiàn)污染狀況我們負(fù)責(zé)免費(fèi)發(fā)送一株細(xì)胞。
收到細(xì)胞時(shí)如無異常情況,請?jiān)陲@微鏡下觀察細(xì)胞密度,如為貼壁細(xì)胞,未超過80%匯合度時(shí),將培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)液吸出,留下10ml培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng);超過80%匯合度時(shí),請按細(xì)胞培養(yǎng)條件傳代培養(yǎng)。如為懸浮細(xì)胞,吸出培養(yǎng)液、1000轉(zhuǎn)/分鐘離心2分鐘,吸出上清,管底細(xì)胞用新鮮培養(yǎng)基懸浮細(xì)胞后移回培養(yǎng)瓶。
小鼠胚胎干細(xì)胞,E14細(xì)胞圖片細(xì)胞出現(xiàn)問題,不予以重發(fā)的情況有哪些?
(1)客戶造成細(xì)胞污染,不重發(fā);
(2)客戶不正確操作致細(xì)胞狀態(tài)不好,不重發(fā);
(3)非推薦細(xì)胞培養(yǎng)體系致的細(xì)胞狀態(tài)不好,不重發(fā);
(4)細(xì)胞狀態(tài)不好,未提供細(xì)胞培養(yǎng)前3天照片的,不重發(fā);
(5)細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)經(jīng)其它處理的,不重發(fā);
(6)細(xì)胞收到2天內(nèi),未告知,不重發(fā);
(7)視具體情況而定。
XCL2 Protein Human 重組人 XCL2 蛋白 (His 標(biāo)簽)
人肝動脈內(nèi)皮細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mL
AMY2A Others Human 人 AMY2A / Alpha-amylase 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)
NFS-60細(xì)胞,小鼠細(xì)胞G-CSF依賴性 HeLa [ Chang Liver ](張氏肝細(xì)胞) 非洲綠猴腎細(xì)胞;BS-C-1
人口腔表皮樣癌細(xì)胞;KB
PK-15(豬腎細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 食蟹猴 / 恒河猴 CCN3 / NOV Baculovirus-Insect cells ansfected Lysate (positive corol) (denatured)
豹貓肺成纖維樣細(xì)胞;LCL4
GFRA3 Others Mouse 小鼠 GFRA3 / GFR-alpha-3 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)
786-0 人腎透明細(xì)胞腺癌細(xì)胞
Hep G2人細(xì)胞 Hep G2 human hepatocarcinoma cells DMEM+10% FBS
PDGFC Protein Mouse 重組小鼠 PDGF-C / SCDGF 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)
人上皮細(xì)胞(HBEpiC)(5×105 ) 細(xì)胞名稱 種屬
XCL2 Protein Human 重組人 XCL2 蛋白 (His 標(biāo)簽)
人肝動脈內(nèi)皮細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mL
AMY2A Others Human 人 AMY2A / Alpha-amylase 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)
NFS-60細(xì)胞,小鼠細(xì)胞G-CSF依賴性 HeLa [ Chang Liver ](張氏肝細(xì)胞) 非洲綠猴腎細(xì)胞;BS-C-1
人口腔表皮樣癌細(xì)胞;KB
PK-15(豬腎細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 食蟹猴 / 恒河猴 CCN3 / NOV Baculovirus-Insect cells ansfected Lysate (positive corol) (denatured)
IntergratedPotatoMedium
葡萄糖半固體培養(yǎng)基 250(g) incubation media 葡萄糖半固體培養(yǎng)基 250(g)
木糖發(fā)酵管 木糖發(fā)酵管 20支 BR
UBA培養(yǎng)基250用于啤酒中厭氧菌檢測incubationmediaUBA培養(yǎng)基250用于啤酒中厭氧菌檢測
CCDA基礎(chǔ) 250g 用于彎曲桿菌分離培養(yǎng)(WHO方法)
察氏瓊脂培養(yǎng)基/察氏培養(yǎng)基/Czapek Dox Agar 用于酵母菌的培養(yǎng) 250克 國產(chǎn)/進(jìn)口
察氏蛋白胨培養(yǎng)基/Czapek Dox Peptone Agar 酵母菌的培養(yǎng) 250克 國產(chǎn)/進(jìn)口
蠶蛹蛋白胨 BR 250克 國產(chǎn)/進(jìn)口
布氏肉湯/Brucella Broth 用于彎曲桿菌增菌肉湯和布氏瓊脂的制備 250克 國產(chǎn)/進(jìn)口
小鼠胚胎干細(xì)胞,E14細(xì)胞圖片LactobacillusSelectiveAgar
我妻氏培養(yǎng)基基礎(chǔ) Wagstsuma Agar Base 用于副溶血性弧菌神奈川現(xiàn)象試驗(yàn)(GB標(biāo)準(zhǔn)、SN)
新生牛血清 New born calf serum 200毫升 BR
GAM肉湯250g/瓶用于厭氧菌的培養(yǎng),若需要,每培養(yǎng)基中可選擇性添加添加和incubationmediaGAM肉湯250g/瓶用于厭氧菌的培養(yǎng),若需要,每培養(yǎng)基中可選擇性添加添加和1005
m-遠(yuǎn)藤氏培養(yǎng)基 250g 用于濾膜法檢測水中大腸菌群