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產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn) |
品牌 | 上海莼試 |
貨號(hào) | CS-X0300 |
保存條件 | 低溫冷藏 |
英文名稱 | 1 x 10^6 cells/T25培養(yǎng)瓶 |
保質(zhì)期 | 詳見說明書個(gè)月 |
產(chǎn)品名稱:小鼠,P19細(xì)胞圖片
規(guī)格 :1 x 10^6 cells/T25培養(yǎng)瓶
細(xì)胞特性
1) 來源:胚胎;畸胎癌
2) 形態(tài):上皮細(xì)胞樣
3) 含量:>1x106 個(gè)/mL
4) 污染:支原體、細(xì)菌、酵母和真菌檢測(cè)為陰性
5) 規(guī)格:T25瓶或者1mL凍存管包裝
小鼠,P19細(xì)胞圖片細(xì)胞接受后的處理:
1)收到細(xì)胞后,請(qǐng)檢查是否漏液,如果漏液,請(qǐng)拍照片發(fā)給我們。
2)請(qǐng)先在顯微鏡下確認(rèn)細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài),去掉封口膜并將T25瓶置于37℃培養(yǎng)約2-3h。
3)棄去T25瓶中的培養(yǎng)基,添加6ml本公司附帶的完全培養(yǎng)基。
4)如果細(xì)胞長(zhǎng)滿(90%以上)請(qǐng)及時(shí)進(jìn)行細(xì)胞傳代,傳代培養(yǎng)用6ml本公司附帶的完全培養(yǎng)基。
5)接到細(xì)胞次日,請(qǐng)檢查細(xì)胞是否污染,若發(fā)現(xiàn)污染或疑似污染,請(qǐng)及時(shí)與我們?nèi)〉寐?lián)系。
細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備DMEM培養(yǎng)基(DMEM,GIBCO,貨號(hào)11965-092),90%;胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲(chǔ)存。
二.細(xì)胞處理:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于貼壁細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
1.棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。
2.加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺(tái),輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加入3ml此細(xì)胞的培養(yǎng)基終止消化。
3.輕輕吹打后吸出,移入15ml離心管中,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)液后吹勻。
4.移入到事先準(zhǔn)備好的含有5ml培養(yǎng)基的T-25培養(yǎng)瓶中或含有14ml培養(yǎng)基的T-75培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)。
3)細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí),可進(jìn)行細(xì)胞凍存。貼壁細(xì)胞凍存時(shí),先要消化處理并進(jìn)行細(xì)胞計(jì)數(shù)。消化方法按照細(xì)胞傳代方法的1-3步驟進(jìn)行,*的重懸液使用血清。懸浮細(xì)胞直接計(jì)數(shù)后離心,用血清重懸浮,加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻,按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中。本公司按每個(gè)凍存管細(xì)胞數(shù)目大于1X106個(gè)細(xì)胞凍存。
1.一般客戶拿到細(xì)胞后,應(yīng)該注意什么?
客戶收到細(xì)胞先不開蓋,放在培養(yǎng)箱靜置若干小時(shí)后(看細(xì)胞密度而定)在倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞生長(zhǎng)情況,并對(duì)細(xì)胞進(jìn)行不同倍數(shù)拍照(建議受收細(xì)胞時(shí)的培養(yǎng)基拍一張照片,觀察培養(yǎng)基的顏色和是否有漏液情況,顯微鏡下拍細(xì)胞100X,200X各一張),排除細(xì)胞本身污染的情況;收到細(xì)胞未開封,出現(xiàn)污染狀況我們負(fù)責(zé)免費(fèi)發(fā)送一株細(xì)胞。
收到細(xì)胞時(shí)如無異常情況,請(qǐng)?jiān)陲@微鏡下觀察細(xì)胞密度,如為貼壁細(xì)胞,未超過80%匯合度時(shí),將培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)液吸出,留下10ml培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng);超過80%匯合度時(shí),請(qǐng)按細(xì)胞培養(yǎng)條件傳代培養(yǎng)。如為懸浮細(xì)胞,吸出培養(yǎng)液、1000轉(zhuǎn)/分鐘離心2分鐘,吸出上清,管底細(xì)胞用新鮮培養(yǎng)基懸浮細(xì)胞后移回培養(yǎng)瓶。
CCL3 Protein Mouse 重組小鼠 CCL3 / Mip1a 蛋白
人淋巴內(nèi)皮細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mL
EDA2R Others Mouse 小鼠 XEDAR / EDA2R 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照)
D341Med細(xì)胞,人髓母細(xì)胞瘤細(xì)胞 藤黃微球菌/騰黃八疊球菌 貓腎細(xì)胞;CRFK
小鼠瘤株;B16
NIH/3T3(小鼠胚胎細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 人 EVI2A 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照)
草魚腎細(xì)胞;GIK
AMPK Others Human 人 AMPK (G1/B1/A2) Heteroimer 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照)
CL-0258BC-019(人癌細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
HBE, 正常人上皮細(xì)胞系 二氫葉酸缺陷型中國(guó)倉(cāng)鼠卵巢細(xì)胞,CHOdhfr細(xì)胞 CCD-1095Sk(皮膚細(xì)胞)
人胃腺癌細(xì)胞;SGC-7901 [SGC7901]
CD55 Others Human 人 CD55 / DAF 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照)
CCL3 Protein Mouse 重組小鼠 CCL3 / Mip1a 蛋白
人淋巴內(nèi)皮細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mL
EDA2R Others Mouse 小鼠 XEDAR / EDA2R 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照)
D341Med細(xì)胞,人髓母細(xì)胞瘤細(xì)胞 藤黃微球菌/騰黃八疊球菌 貓腎細(xì)胞;CRFK
小鼠瘤株;B16
NIH/3T3(小鼠胚胎細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 人 EVI2A 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照)
抗生素檢定培養(yǎng)基6號(hào)250g用于粘菌素等的效價(jià)測(cè)定
普通瓊脂斜面培養(yǎng)基(pH8.0-8.2) 250(g) incubation media 普通瓊脂斜面培養(yǎng)基(pH8.0-8.2) 250(g)
馬鈴薯葡萄糖瓊脂(PDA) 250g 供霉菌和酵母菌計(jì)數(shù)及分離培養(yǎng)
三號(hào)膽鹽于incubationmedia三號(hào)膽鹽于
SC瓊脂基礎(chǔ) 250g 用于產(chǎn)氣莢膜梭菌的計(jì)數(shù)和培養(yǎng),需天極D-環(huán)絲氨酸和50%卵黃乳液(ISO標(biāo)準(zhǔn))
哥倫比亞血瓊脂基礎(chǔ)/Columbia Blood Agar Base 各種細(xì)菌的基礎(chǔ)培養(yǎng)基 250克 國(guó)產(chǎn)/進(jìn)口
哥倫比亞瓊脂培養(yǎng)基/Columbia Agar Medium 營(yíng)養(yǎng)要求較高的細(xì)菌的培養(yǎng)基及溶血試驗(yàn),梭菌的檢測(cè) 250克 國(guó)產(chǎn)/進(jìn)口
哥倫比亞MUG培養(yǎng)基/哥倫比亞4-甲基傘形葡糖苷酸培養(yǎng)基/Columbia-MUG Medium 大腸桿菌的熒光檢測(cè) 250克 國(guó)產(chǎn)/進(jìn)口
哥倫比亞CAN瓊脂基礎(chǔ)/Columbia CAN Agar Base 分離革蘭氏陽性球菌 250克 國(guó)產(chǎn)/進(jìn)口
小鼠,P19細(xì)胞圖片MiddleBrook7H250g用于分枝桿菌的分離培養(yǎng)
Listeria enrichment broth( base)FDA/IDF-FIL 1.11951.0500 MERCK默克 incubation media Listeria enrichment broth( base)FDA/IDF-FIL 1.11951.0500 MERCK默克
3%氯胰蛋白胨大豆瓊脂 250g 用于副溶血性弧菌的生長(zhǎng)試驗(yàn)。(SN0173-2010和GB/T4789.7-2008)
F344胎鼠海馬神經(jīng)元完全培養(yǎng)基Th
小鼠,P19細(xì)胞圖片細(xì)胞出現(xiàn)問題,不予以重發(fā)的情況有哪些?
(1)客戶造成細(xì)胞污染,不重發(fā);
(2)客戶不正確操作致細(xì)胞狀態(tài)不好,不重發(fā);
(3)非推薦細(xì)胞培養(yǎng)體系致的細(xì)胞狀態(tài)不好,不重發(fā);
(4)細(xì)胞狀態(tài)不好,未提供細(xì)胞培養(yǎng)前3天照片的,不重發(fā);
(5)細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)經(jīng)其它處理的,不重發(fā);
(6)細(xì)胞收到2天內(nèi),未告知,不重發(fā);
(7)視具體情況而定。