![]() |
產(chǎn)地 | 進口、國產(chǎn) |
品牌 | 上海莼試 |
貨號 | CS-X0165 |
保存條件 | 低溫冷藏 |
英文名稱 | 1 x 10^6 cells/T25培養(yǎng)瓶 |
保質(zhì)期 | 詳見說明書個月 |
產(chǎn)品名稱:人類星形膠質(zhì)細胞瘤細胞,U251細胞說明書
規(guī)格 :1 x 10^6 cells/T25培養(yǎng)瓶
細胞特性
1)來源:細胞癌
2)形態(tài):貼壁細胞
3)含量:>1x106 個/mL
4)污染:支原體、細菌、酵母和真菌檢測為陰性
5)規(guī)格:T25瓶或者1mL凍存管包裝
人類星形膠質(zhì)細胞瘤細胞,U251細胞說明書細胞接受后的處理:
1)收到細胞后,請檢查是否漏液,如果漏液,請拍照片發(fā)給我們。
2)請先在顯微鏡下確認細胞生長狀態(tài),去掉封口膜并將T25瓶置于37℃培養(yǎng)約2-3h。
3)棄去T25瓶中的培養(yǎng)基,添加6ml本公司附帶的完全培養(yǎng)基。
4)如果細胞長滿(90%以上)請及時進行細胞傳代,傳代培養(yǎng)用6ml本公司附帶的完全培養(yǎng)基。
5)接到細胞次日,請檢查細胞是否污染,若發(fā)現(xiàn)污染或疑似污染,請及時與我們?nèi)〉寐?lián)系。
細胞培養(yǎng)操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備:
1) 準備基礎(chǔ)培養(yǎng)基( GIBCO,,添加NaHCO3 1.5g/L,丙酮酸鈉 0.11g/L);優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2) 培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。溫度:37攝氏度,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3) 凍存液:90%完全培養(yǎng)基,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲存。
二. 細胞處理:
1) 復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜(或?qū)⒓毎麘乙杭尤?/span>250px皿中,加入約8ml培養(yǎng)基,培養(yǎng)過夜)。第二天換液并檢查細胞密度。
2) 細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。
對于貼壁細胞,傳代可參考以下方法:
1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mMEDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3. 按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3)細胞凍存:待細胞生長狀態(tài)良好時,可進行細胞凍存。貼壁細胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶,細胞變圓脫落后,加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中,再添加10%DMSO后進行凍存。
1.一般客戶拿到細胞后,應該注意什么?
客戶收到細胞先不開蓋,放在培養(yǎng)箱靜置若干小時后(看細胞密度而定)在倒置顯微鏡下觀察細胞生長情況,并對細胞進行不同倍數(shù)拍照(建議受收細胞時的培養(yǎng)基拍一張照片,觀察培養(yǎng)基的顏色和是否有漏液情況,顯微鏡下拍細胞100X,200X各一張),排除細胞本身污染的情況;收到細胞未開封,出現(xiàn)污染狀況我們負責免費發(fā)送一株細胞。
收到細胞時如無異常情況,請在顯微鏡下觀察細胞密度,如為貼壁細胞,未超過80%匯合度時,將培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)液吸出,留下10ml培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng);超過80%匯合度時,請按細胞培養(yǎng)條件傳代培養(yǎng)。如為懸浮細胞,吸出培養(yǎng)液、1000轉(zhuǎn)/分鐘離心2分鐘,吸出上清,管底細胞用新鮮培養(yǎng)基懸浮細胞后移回培養(yǎng)瓶。
人類星形膠質(zhì)細胞瘤細胞,U251細胞說明書細胞出現(xiàn)問題,不予以重發(fā)的情況有哪些?
(1)客戶造成細胞污染,不重發(fā);
(2)客戶不正確操作致細胞狀態(tài)不好,不重發(fā);
(3)非推薦細胞培養(yǎng)體系致的細胞狀態(tài)不好,不重發(fā);
(4)細胞狀態(tài)不好,未提供細胞培養(yǎng)前3天照片的,不重發(fā);
(5)細胞培養(yǎng)時經(jīng)其它處理的,不重發(fā);
(6)細胞收到2天內(nèi),未告知,不重發(fā);
(7)視具體情況而定。
VTN Protein Mouse 重組小鼠 Vionectin / VTN 蛋白 (His 標簽)
MKN-45 低分化
CD79B Others Mouse 小鼠 CD79B / B29 人細胞裂解液 (陽性對照)
Calu-1人細胞 Calu-1 human lung cancer cells McCOY's 5A+10%FBS
TNFa轉(zhuǎn)染耐VP16絨癌細胞;JEG-3-VP16-TNFa
人永生化表皮細胞;HaCaT 人上皮細胞完全培養(yǎng)基 100mL
CL-0261BC-022(人癌細胞)5×106cells/瓶×2
IFNB1 Others Mouse 小鼠 IFNB1 / IFN-beta / Ierferon beta 人細胞裂解液 (陽性對照)
人髓核細胞cDNAHNPC cDNA
T47D細胞,人管癌細胞 豬腎細胞系,IBRS-2細胞 Many types of cells包裝:5 × 105次方(1ml)
MC3T3-E1(小鼠胚胎成骨細胞前體細胞) 5×106cells/瓶×2
HCMEC Pellet 人微內(nèi)皮細胞團塊 > 1 mio.cells 纖維母細胞粘附檢測試劑盒Fibro
VTN Protein Mouse 重組小鼠 Vionectin / VTN 蛋白 (His 標簽)
MKN-45 低分化
CD79B Others Mouse 小鼠 CD79B / B29 人細胞裂解液 (陽性對照)
Calu-1人細胞 Calu-1 human lung cancer cells McCOY's 5A+10%FBS
TNFa轉(zhuǎn)染耐VP16絨癌細胞;JEG-3-VP16-TNFa
人永生化表皮細胞;HaCaT 人上皮細胞完全培養(yǎng)基 100mL
牛肝顆粒同肝湯配套使用
Fraser Broth Base incubation media Fraser Broth Base
變形桿菌 支/瓶
啶酮酸5.0mg/支*5每支添加于225mlHBJ005中制成LB1肉湯
玫瑰紅瓊脂 250g 用于霉菌、酵母菌計數(shù)
歐洲藥典培養(yǎng)基(EP標準)
李斯特菌顯色培養(yǎng)基 1000 mL/瓶 incubation media 李斯特菌顯色培養(yǎng)基 1000 mL/瓶
李氏增菌液LB1凍干配套試劑 10支 每支添加于225ml(026040)中配成LB1增菌液。
培養(yǎng)基PMediumP(Reinforedmediumforclostridia)用于梭菌的增菌培養(yǎng)和計數(shù)。
APTAgar
人類星形膠質(zhì)細胞瘤細胞,U251細胞說明書Crystalvioletbloodagarbase
DEV Lactose peptone broth DEV乳糖蛋白胨肉湯 1.10690.0500 MERCK默克 incubation media DEV Lactose peptone broth DEV乳糖蛋白胨肉湯 1.10690.0500 MERCK默克
馬鈴薯葡萄糖半固體瓊脂 250g 用于椰毒假單胞菌酵米面亞種的產(chǎn)毒培養(yǎng)
脂肪間質(zhì)干細胞成脂誘導分化培養(yǎng)基Adultadiposederivedmesenchymalstemcellsintotheculturemediuminduceddifferentiationoffat
MFBMedium