![]() |
產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn) |
品牌 | 上海莼試 |
貨號(hào) | CS-X0158 |
保存條件 | 低溫冷藏 |
英文名稱 | 1 x 10^6 cells/T25培養(yǎng)瓶 |
保質(zhì)期 | 詳見說明書個(gè)月 |
產(chǎn)品名稱:人細(xì)胞,HCT-15細(xì)胞規(guī)格
規(guī)格 :1 x 10^6 cells/T25培養(yǎng)瓶
細(xì)胞特性
1)來源:結(jié)直腸腺癌
2)形態(tài):上皮細(xì)胞樣,貼壁生長(zhǎng)
3)含量:>1x106 個(gè)/mL
4)污染:支原體、細(xì)菌、酵母和真菌檢測(cè)為陰性
5)規(guī)格:T25瓶或者1mL凍存管包裝
人細(xì)胞,HCT-15細(xì)胞規(guī)格細(xì)胞接受后的處理:
1)收到細(xì)胞后,請(qǐng)檢查是否漏液,如果漏液,請(qǐng)拍照片發(fā)給我們。
2)請(qǐng)先在顯微鏡下確認(rèn)細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài),去掉封口膜并將T25瓶置于37℃培養(yǎng)約2-3h。
3)棄去T25瓶中的培養(yǎng)基,添加6ml本公司附帶的完全培養(yǎng)基。
4)如果細(xì)胞長(zhǎng)滿(90%以上)請(qǐng)及時(shí)進(jìn)行細(xì)胞傳代,傳代培養(yǎng)用6ml本公司附帶的完全培養(yǎng)基。
5)接到細(xì)胞次日,請(qǐng)檢查細(xì)胞是否污染,若發(fā)現(xiàn)污染或疑似污染,請(qǐng)及時(shí)與我們?nèi)〉寐?lián)系。
細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1) 準(zhǔn)備基礎(chǔ)培養(yǎng)基( GIBCO,,添加NaHCO3 1.5g/L,丙酮酸鈉 0.11g/L);優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2) 培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。溫度:37攝氏度,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3) 凍存液:90%完全培養(yǎng)基,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲(chǔ)存。
二. 細(xì)胞處理:
1) 復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜(或?qū)⒓?xì)胞懸液加入250px皿中,加入約8ml培養(yǎng)基,培養(yǎng)過夜)。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2) 細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于貼壁細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。
2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mMEDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺(tái),輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3. 按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3)細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí),可進(jìn)行細(xì)胞凍存。貼壁細(xì)胞凍存時(shí),棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶,細(xì)胞變圓脫落后,加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中,再添加10%DMSO后進(jìn)行凍存。
1.一般客戶拿到細(xì)胞后,應(yīng)該注意什么?
客戶收到細(xì)胞先不開蓋,放在培養(yǎng)箱靜置若干小時(shí)后(看細(xì)胞密度而定)在倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞生長(zhǎng)情況,并對(duì)細(xì)胞進(jìn)行不同倍數(shù)拍照(建議受收細(xì)胞時(shí)的培養(yǎng)基拍一張照片,觀察培養(yǎng)基的顏色和是否有漏液情況,顯微鏡下拍細(xì)胞100X,200X各一張),排除細(xì)胞本身污染的情況;收到細(xì)胞未開封,出現(xiàn)污染狀況我們負(fù)責(zé)免費(fèi)發(fā)送一株細(xì)胞。
收到細(xì)胞時(shí)如無異常情況,請(qǐng)?jiān)陲@微鏡下觀察細(xì)胞密度,如為貼壁細(xì)胞,未超過80%匯合度時(shí),將培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)液吸出,留下10ml培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng);超過80%匯合度時(shí),請(qǐng)按細(xì)胞培養(yǎng)條件傳代培養(yǎng)。如為懸浮細(xì)胞,吸出培養(yǎng)液、1000轉(zhuǎn)/分鐘離心2分鐘,吸出上清,管底細(xì)胞用新鮮培養(yǎng)基懸浮細(xì)胞后移回培養(yǎng)瓶。
人細(xì)胞,HCT-15細(xì)胞規(guī)格細(xì)胞出現(xiàn)問題,不予以重發(fā)的情況有哪些?
(1)客戶造成細(xì)胞污染,不重發(fā);
(2)客戶不正確操作致細(xì)胞狀態(tài)不好,不重發(fā);
(3)非推薦細(xì)胞培養(yǎng)體系致的細(xì)胞狀態(tài)不好,不重發(fā);
(4)細(xì)胞狀態(tài)不好,未提供細(xì)胞培養(yǎng)前3天照片的,不重發(fā);
(5)細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)經(jīng)其它處理的,不重發(fā);
(6)細(xì)胞收到2天內(nèi),未告知,不重發(fā);
(7)視具體情況而定。
MIF Protein Mouse 重組小鼠 MIF / Migration Inhibitory Factor 蛋白 (His 標(biāo)簽)
MDA-MB-453 人癌細(xì)胞
ADAM15 Others Mouse 小鼠 ADAM15 / MDC15 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)
NCI-H1650人非小細(xì)胞細(xì)胞 NCI-H1650 cells in human non small cell lung cancer 1640+10%FBS
人*癌細(xì)胞;AsPC-1
人胚胎*組織來源細(xì)胞;CCC-HPE-2 人平滑肌細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mL
CL-0276H-97(人高轉(zhuǎn)移細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
RAB27B Others Human 人 RAB27B 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)
人角膜細(xì)胞cDNAHK cDNA
豬腎細(xì)胞;PK(15) 人惡性非霍奇金患者的自然殺傷細(xì)胞,NK-92MI細(xì)胞 U27細(xì)胞,KM小鼠子瘤株
人胚腎細(xì)胞(亞系克隆);FIP293
HA Others H5N1 甲型 H5N1 (A/duck/Hunan/795/2002) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)
MIF Protein Mouse 重組小鼠 MIF / Migration Inhibitory Factor 蛋白 (His 標(biāo)簽)
MDA-MB-453 人癌細(xì)胞
ADAM15 Others Mouse 小鼠 ADAM15 / MDC15 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)
NCI-H1650人非小細(xì)胞細(xì)胞 NCI-H1650 cells in human non small cell lung cancer 1640+10%FBS
人*癌細(xì)胞;AsPC-1
人胚胎*組織來源細(xì)胞;CCC-HPE-2 人平滑肌細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mL
庖肉培養(yǎng)基基礎(chǔ)2750g用于厭氧菌的增菌培養(yǎng)和保存,還用于肉毒梭菌及兼性厭氧和厭氧梭狀芽孢桿菌的檢驗(yàn)(GB/T8538-200...
Tryptone Broth 培養(yǎng)基 250g incubation media Tryptone Broth 培養(yǎng)基 250g
宇佐美曲霉 支/瓶
結(jié)晶紫中性紅膽鹽葡萄糖瓊脂(VRBGA)250g用于奶粉中阪崎桿菌的分離培養(yǎng)(FDA、SN方法)
BCYE瓊脂基礎(chǔ) 100g 用于軍團(tuán)菌的選擇性分離培養(yǎng)(ISO標(biāo)準(zhǔn))
培養(yǎng)基(改良高氏50g用于的分離培養(yǎng)
假單胞菌瓊脂F 用甘油在熒光素產(chǎn)生的基礎(chǔ)上檢測(cè)鑒別銅綠假單胞菌 500g incubation media 假單胞菌瓊脂F 用甘油在熒光素產(chǎn)生的基礎(chǔ)上檢測(cè)鑒別銅綠假單胞菌 500g
產(chǎn)氨短桿菌 產(chǎn)肌苷酸 支/瓶
ShigellaEnrichmentBroth
PhosphateGlucosePeptoneWaterMedium
人細(xì)胞,HCT-15細(xì)胞規(guī)格L-酪酸營(yíng)養(yǎng)瓊脂基礎(chǔ)28382250g用于蠟樣芽孢桿菌的L-酪酸分解試驗(yàn)。
Dermasel 瓊脂 (CM0539) Oxoid incubation media Dermasel 瓊脂 (CM0539) Oxoid
酸土脂環(huán)芽孢桿菌 牛奶中青霉素的檢測(cè);用于益生菌類食品 支/瓶
PresenceAbsenceBroth
Mueller-HintonAgar