產(chǎn)品名稱：人間變性大細(xì)胞細(xì)胞，Karpas-299細(xì)胞說明書
規(guī)格 ：1 x 10^6 cells/T25培養(yǎng)瓶
細(xì)胞特性
1）來源：

2）形態(tài)：圓形，懸浮生長

3）含量：>1x106 個/mL

4）污染：支原體、細(xì)菌、酵母和真菌檢測為陰性

5）規(guī)格：T25瓶或者1mL凍存管包裝

人間變性大細(xì)胞細(xì)胞，Karpas-299細(xì)胞說明書細(xì)胞接受后的處理：
1）收到細(xì)胞后，請檢查是否漏液，如果漏液，請拍照片發(fā)給我們。
2）請先在顯微鏡下確認(rèn)細(xì)胞生長狀態(tài)，去掉封口膜并將T25瓶置于37℃培養(yǎng)約2-3h。
3）棄去T25瓶中的培養(yǎng)基，添加6ml本公司附帶的完全培養(yǎng)基。
4）如果細(xì)胞長滿（90%以上）請及時進行細(xì)胞傳代，傳代培養(yǎng)用6ml本公司附帶的完全培養(yǎng)基。
5）接到細(xì)胞次日，請檢查細(xì)胞是否污染，若發(fā)現(xiàn)污染或疑似污染，請及時與我們?nèi)〉寐?lián)系。
細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：

1） 準(zhǔn)備基礎(chǔ)培養(yǎng)基( GIBCO，，添加NaHCO3 1.5g/L，丙酮酸鈉 0.11g/L)；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。

2） 培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。溫度：37攝氏度，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3） 凍存液：90%完全培養(yǎng)基，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲存。

二． 細(xì)胞處理：

1） 復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入250px皿中，加入約8ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。

2） 細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。

對于貼壁細(xì)胞，傳代可參考以下方法：

1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。

2. 加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mMEDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。

3. 按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。

4. 將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

3）細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時，可進行細(xì)胞凍存。貼壁細(xì)胞凍存時，棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶，細(xì)胞變圓脫落后，加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中，再添加10%DMSO后進行凍存。
1.一般客戶拿到細(xì)胞后，應(yīng)該注意什么？
客戶收到細(xì)胞先不開蓋，放在培養(yǎng)箱靜置若干小時后（看細(xì)胞密度而定）在倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞生長情況，并對細(xì)胞進行不同倍數(shù)拍照（建議受收細(xì)胞時的培養(yǎng)基拍一張照片，觀察培養(yǎng)基的顏色和是否有漏液情況，顯微鏡下拍細(xì)胞100X，200X各一張），排除細(xì)胞本身污染的情況；收到細(xì)胞未開封，出現(xiàn)污染狀況我們負(fù)責(zé)免費發(fā)送一株細(xì)胞。
收到細(xì)胞時如無異常情況，請在顯微鏡下觀察細(xì)胞密度，如為貼壁細(xì)胞，未超過80%匯合度時，將培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)液吸出，留下10ml培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng)；超過80%匯合度時，請按細(xì)胞培養(yǎng)條件傳代培養(yǎng)。如為懸浮細(xì)胞，吸出培養(yǎng)液、1000轉(zhuǎn)/分鐘離心2分鐘，吸出上清，管底細(xì)胞用新鮮培養(yǎng)基懸浮細(xì)胞后移回培養(yǎng)瓶。
人間變性大細(xì)胞細(xì)胞，Karpas-299細(xì)胞說明書細(xì)胞出現(xiàn)問題，不予以重發(fā)的情況有哪些？
（1）客戶造成細(xì)胞污染，不重發(fā)；
（2）客戶不正確操作致細(xì)胞狀態(tài)不好，不重發(fā)；
（3）非推薦細(xì)胞培養(yǎng)體系致的細(xì)胞狀態(tài)不好，不重發(fā)；
（4）細(xì)胞狀態(tài)不好，未提供細(xì)胞培養(yǎng)前3天照片的，不重發(fā)；
（5）細(xì)胞培養(yǎng)時經(jīng)其它處理的，不重發(fā)；
（6）細(xì)胞收到2天內(nèi)，未告知，不重發(fā)；
（7）視具體情況而定。
FLT3LG Protein Mouse 重組小鼠 FLT3L / Flt3 ligand 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)

LA795瘤 肺腺癌

LAIR2 Others Human 人 LAIR2 / CD306 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)

SK-OV-3人細(xì)胞 Human ovarian cancer cell line SK-OV-3 McCoy'*+10% FBS

大鼠肝細(xì)胞瘤;H4-II-E-C3

小鼠骨髓間充質(zhì)肝細(xì)胞(MMSC-bm)(5×105) PANC-1, 人*癌細(xì)胞 Human
CL-0321BEL-7405(人細(xì)胞)5×106cells/瓶×2

MANF Others Mouse 小鼠 MANF / ARMET 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)

小鼠肺大內(nèi)皮細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mL

LLC1[LL/2]小鼠Lewis細(xì)胞 LLC1[LL/2] mice with Lewis lung cancer cells 1640+10% FBS

IL1B Protein Human 重組人 IL-1 beta / IL1B 蛋白 (pro form, His 標(biāo)簽)

NCI-H716(人結(jié)直腸腺癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 3T3-L1(小鼠脂肪細(xì)胞)
FLT3LG Protein Mouse 重組小鼠 FLT3L / Flt3 ligand 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)

LA795瘤 肺腺癌

LAIR2 Others Human 人 LAIR2 / CD306 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)

SK-OV-3人細(xì)胞 Human ovarian cancer cell line SK-OV-3 McCoy'*+10% FBS

大鼠肝細(xì)胞瘤;H4-II-E-C3

小鼠骨髓間充質(zhì)肝細(xì)胞(MMSC-bm)(5×105) PANC-1, 人*癌細(xì)胞 Human
葡萄糖肉浸液肉湯24080250g用于溶血性鏈球菌及其它營養(yǎng)要求較高的細(xì)菌的增菌培養(yǎng)(GB/T4789.28-2003中4.T4789...

Crossley Milk Medium/Crossley 牛奶培養(yǎng)基 Oxoid 500G incubation media Crossley Milk Medium/Crossley 牛奶培養(yǎng)基 Oxoid 500G

溶藻細(xì)菌 產(chǎn)灰黃霉素 支/瓶

PlateCountAgar

溴化十六烷基銨瓊脂(USP) 250g 用于綠膿假單胞菌的分離培養(yǎng)
葡萄糖酸鹽20支綠膿桿菌用

定位顯色培養(yǎng)基 用于尿道細(xì)菌分離和鑒別，也可用于標(biāo)本的病原菌分離 1000ml incubation media 定位顯色培養(yǎng)基 用于尿道細(xì)菌分離和鑒別，也可用于標(biāo)本的病原菌分離 1000ml

康寧木霉 支/瓶

Amies運送培養(yǎng)基管20支/包用于致病菌標(biāo)本的運送保存

綠膿菌素測定用培養(yǎng)基(PDP瓊脂培養(yǎng)基) 250g 用于銅綠假單胞菌的綠膿菌測定
人間變性大細(xì)胞細(xì)胞，Karpas-299細(xì)胞說明書大腸桿菌O7顯色培養(yǎng)基CRM007l用于大腸桿菌O7的快速分離和鑒定

CTX-M顯色培養(yǎng)基 用于新型超廣譜β內(nèi)酰胺酶(ESBL)產(chǎn)生菌CTX-M型的分離和鑒定 1000ml incubation media CTX-M顯色培養(yǎng)基 用于新型超廣譜β內(nèi)酰胺酶(ESBL)產(chǎn)生菌CTX-M型的分離和鑒定 1000ml

兩型孢毛霉 產(chǎn)蛋白酶 支/瓶

DoubleLactosePeptoneBroth

HB0235-7