產(chǎn)品名稱：人高轉(zhuǎn)移細胞，95-D細胞說明書
規(guī)格 ：1 x 10^6 cells/T25培養(yǎng)瓶
細胞特性
1）來源：

2）形態(tài)：上皮細胞樣

3）含量：>1x106 個/mL

4）污染：支原體、細菌、酵母和真菌檢測為陰性

5）規(guī)格：T25瓶或者1mL凍存管包裝

人高轉(zhuǎn)移細胞，95-D細胞說明書細胞接受后的處理：
1）收到細胞后，請檢查是否漏液，如果漏液，請拍照片發(fā)給我們。
2）請先在顯微鏡下確認細胞生長狀態(tài)，去掉封口膜并將T25瓶置于37℃培養(yǎng)約2-3h。
3）棄去T25瓶中的培養(yǎng)基，添加6ml本公司附帶的完全培養(yǎng)基。
4）如果細胞長滿（90%以上）請及時進行細胞傳代，傳代培養(yǎng)用6ml本公司附帶的完全培養(yǎng)基。
5）接到細胞次日，請檢查細胞是否污染，若發(fā)現(xiàn)污染或疑似污染，請及時與我們?nèi)〉寐?lián)系。
細胞培養(yǎng)操作規(guī)程：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備：

1） 準備基礎培養(yǎng)基( GIBCO，，添加NaHCO3 1.5g/L，丙酮酸鈉 0.11g/L)；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。

2） 培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。溫度：37攝氏度，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3） 凍存液：90%完全培養(yǎng)基，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲存。

二． 細胞處理：

1） 復蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜（或?qū)⒓毎麘乙杭尤?/span>250px皿中，加入約8ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）。第二天換液并檢查細胞密度。

2） 細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。

對于貼壁細胞，傳代可參考以下方法：

1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。

2. 加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mMEDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。

3. 按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。

4. 將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

3）細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時，可進行細胞凍存。貼壁細胞凍存時，棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶，細胞變圓脫落后，加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中，再添加10%DMSO后進行凍存。
1.一般客戶拿到細胞后，應該注意什么？
客戶收到細胞先不開蓋，放在培養(yǎng)箱靜置若干小時后（看細胞密度而定）在倒置顯微鏡下觀察細胞生長情況，并對細胞進行不同倍數(shù)拍照（建議受收細胞時的培養(yǎng)基拍一張照片，觀察培養(yǎng)基的顏色和是否有漏液情況，顯微鏡下拍細胞100X，200X各一張），排除細胞本身污染的情況；收到細胞未開封，出現(xiàn)污染狀況我們負責免費發(fā)送一株細胞。
收到細胞時如無異常情況，請在顯微鏡下觀察細胞密度，如為貼壁細胞，未超過80%匯合度時，將培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)液吸出，留下10ml培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng)；超過80%匯合度時，請按細胞培養(yǎng)條件傳代培養(yǎng)。如為懸浮細胞，吸出培養(yǎng)液、1000轉(zhuǎn)/分鐘離心2分鐘，吸出上清，管底細胞用新鮮培養(yǎng)基懸浮細胞后移回培養(yǎng)瓶。
人高轉(zhuǎn)移細胞，95-D細胞說明書細胞出現(xiàn)問題，不予以重發(fā)的情況有哪些？
（1）客戶造成細胞污染，不重發(fā)；
（2）客戶不正確操作致細胞狀態(tài)不好，不重發(fā)；
（3）非推薦細胞培養(yǎng)體系致的細胞狀態(tài)不好，不重發(fā)；
（4）細胞狀態(tài)不好，未提供細胞培養(yǎng)前3天照片的，不重發(fā)；
（5）細胞培養(yǎng)時經(jīng)其它處理的，不重發(fā)；
（6）細胞收到2天內(nèi)，未告知，不重發(fā)；
（7）視具體情況而定。
VEGFA Protein Human 重組人 VEGF121b / VEGF-A 蛋白

HGC-27 人細胞(未分化)

CD80 Others Mouse 小鼠 CD80 / B7-1 人細胞裂解液 (陽性對照)

HuT 78人T淋巴細胞細胞 HuT 78 human T lymphocyte leukemia cell IMDM培養(yǎng)基+20%FBS

非洲綠猴腎細胞系/HCV-E1;Vero-HCV-E1

大鼠雪旺細胞(RSC)(5×105) 786-O [786-0], 人腎透明腺癌細胞 Human
CL-0386MPC-11(小鼠漿細胞瘤)5×106cells/瓶×2

EFNB1 Others Rat 大鼠 Ephrin-B1 / EFNB1 人細胞裂解液 (陽性對照)

小鼠氣管平滑肌細胞完全培養(yǎng)基 100mL

EJ人細胞 Human bladder cancer cell line EJ 1640+10% FBS

IL36B Protein Mouse 重組小鼠 IL1F8 / IL36b 蛋白

NCI-H23(人非小細胞細胞) 5×106cells/瓶×2 THP-1(單核細胞)
VEGFA Protein Human 重組人 VEGF121b / VEGF-A 蛋白

HGC-27 人細胞(未分化)

CD80 Others Mouse 小鼠 CD80 / B7-1 人細胞裂解液 (陽性對照)

HuT 78人T淋巴細胞細胞 HuT 78 human T lymphocyte leukemia cell IMDM培養(yǎng)基+20%FBS

非洲綠猴腎細胞系/HCV-E1;Vero-HCV-E1

大鼠雪旺細胞(RSC)(5×105) 786-O [786-0], 人腎透明腺癌細胞 Human
瓊脂培養(yǎng)基L250g用于沙門氏菌的選擇性分離培養(yǎng)

APT agar APT瓊脂 1.10453.0500 MERCK默克 incubation media APT agar APT瓊脂 1.10453.0500 MERCK默克

胰酪胨大豆酵母浸膏瓊脂 250g 廣泛用于細菌的培養(yǎng)，特別用于食品中李斯特氏菌的分離培養(yǎng)(GB/T4789.30-2010和SN/T 0184-2005，I...

假單胞分離瓊脂PseudomonasIsolationAgar用于假單胞菌群的測定

氯化血紅素 1g 添加于HB0398中
瓊脂培養(yǎng)基L250g用于沙門氏菌的選擇性分離培養(yǎng)

APT agar APT瓊脂 1.10453.0500 MERCK默克 incubation media APT agar APT瓊脂 1.10453.0500 MERCK默克

胰酪胨大豆酵母浸膏瓊脂 250g 廣泛用于細菌的培養(yǎng)，特別用于食品中李斯特氏菌的分離培養(yǎng)(GB/T4789.30-2010和SN/T 0184-2005，I...

假單胞分離瓊脂PseudomonasIsolationAgar用于假單胞菌群的測定

氯化血紅素 1g 添加于HB0398中
人高轉(zhuǎn)移細胞，95-D細胞說明書結(jié)晶紫中性紅膽鹽葡萄糖瓊脂(VRBGA)22222250g用于阪崎腸桿菌的選擇性分離培養(yǎng)以及腸道菌的計數(shù)和鑒別(SN/T5)。

Casein 干酪素 500g incubation media Casein 干酪素 500g

委內(nèi)瑞拉鏈霉菌 支/瓶

M-EndoMedium

TCH(噻吩-2-羧酸酰肼) 0.1g 加入改良羅氏培養(yǎng)基中制成TCH培養(yǎng)基，用于分枝桿菌鑒定