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產(chǎn)地 | 進口、國產(chǎn) |
品牌 | 上海莼試 |
貨號 | CS-X0086 |
保存條件 | 低溫冷藏 |
英文名稱 | 1 x 10^6 cells/T25培養(yǎng)瓶 |
保質(zhì)期 | 詳見說明書個月 |
產(chǎn)品名稱:人,SPC-A1細胞規(guī)格
規(guī)格 :1 x 10^6 cells/T25培養(yǎng)瓶
細胞特性
1)來源:
2)形態(tài):上皮細胞樣
3)含量:>1x106 個/mL
4)污染:支原體、細菌、酵母和真菌檢測為陰性
5)規(guī)格:T25瓶或者1mL凍存管包裝
人,SPC-A1細胞規(guī)格細胞接受后的處理:
1)收到細胞后,請檢查是否漏液,如果漏液,請拍照片發(fā)給我們。
2)請先在顯微鏡下確認細胞生長狀態(tài),去掉封口膜并將T25瓶置于37℃培養(yǎng)約2-3h。
3)棄去T25瓶中的培養(yǎng)基,添加6ml本公司附帶的完全培養(yǎng)基。
4)如果細胞長滿(90%以上)請及時進行細胞傳代,傳代培養(yǎng)用6ml本公司附帶的完全培養(yǎng)基。
5)接到細胞次日,請檢查細胞是否污染,若發(fā)現(xiàn)污染或疑似污染,請及時與我們?nèi)〉寐?lián)系。
細胞培養(yǎng)操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備:
1) 準備基礎(chǔ)培養(yǎng)基( GIBCO,,添加NaHCO3 1.5g/L,丙酮酸鈉 0.11g/L);優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2) 培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。溫度:37攝氏度,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3) 凍存液:90%完全培養(yǎng)基,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲存。
二. 細胞處理:
1) 復(fù)蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜(或?qū)⒓毎麘乙杭尤?/span>250px皿中,加入約8ml培養(yǎng)基,培養(yǎng)過夜)。第二天換液并檢查細胞密度。
2) 細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。
對于貼壁細胞,傳代可參考以下方法:
1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mMEDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3. 按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3)細胞凍存:待細胞生長狀態(tài)良好時,可進行細胞凍存。貼壁細胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶,細胞變圓脫落后,加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中,再添加10%DMSO后進行凍存。
1.一般客戶拿到細胞后,應(yīng)該注意什么?
客戶收到細胞先不開蓋,放在培養(yǎng)箱靜置若干小時后(看細胞密度而定)在倒置顯微鏡下觀察細胞生長情況,并對細胞進行不同倍數(shù)拍照(建議受收細胞時的培養(yǎng)基拍一張照片,觀察培養(yǎng)基的顏色和是否有漏液情況,顯微鏡下拍細胞100X,200X各一張),排除細胞本身污染的情況;收到細胞未開封,出現(xiàn)污染狀況我們負責(zé)免費發(fā)送一株細胞。
收到細胞時如無異常情況,請在顯微鏡下觀察細胞密度,如為貼壁細胞,未超過80%匯合度時,將培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)液吸出,留下10ml培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng);超過80%匯合度時,請按細胞培養(yǎng)條件傳代培養(yǎng)。如為懸浮細胞,吸出培養(yǎng)液、1000轉(zhuǎn)/分鐘離心2分鐘,吸出上清,管底細胞用新鮮培養(yǎng)基懸浮細胞后移回培養(yǎng)瓶。
人,SPC-A1細胞規(guī)格細胞出現(xiàn)問題,不予以重發(fā)的情況有哪些?
(1)客戶造成細胞污染,不重發(fā);
(2)客戶不正確操作致細胞狀態(tài)不好,不重發(fā);
(3)非推薦細胞培養(yǎng)體系致的細胞狀態(tài)不好,不重發(fā);
(4)細胞狀態(tài)不好,未提供細胞培養(yǎng)前3天照片的,不重發(fā);
(5)細胞培養(yǎng)時經(jīng)其它處理的,不重發(fā);
(6)細胞收到2天內(nèi),未告知,不重發(fā);
(7)視具體情況而定。
TNFSF11 Protein Mouse 重組小鼠 RANKL / OPGL / TNFSF11 / CD254 蛋白 (Fc 標簽)
HAL-01 人急性混合型細胞
CD302 Others Mouse 小鼠 CD302 / CLEC13A 人細胞裂解液 (陽性對照)
HCT-8 [HRT-18]人回盲細胞 HCT-8 [HRT-18] human ileocecal carcinoma cells RPMI-1640(GIBCO)+10%FBS
SV40T轉(zhuǎn)化的人胚腎細胞;293T
人肺間充質(zhì)干細胞(肺)(HPMSC)(5×105) U251人細胞 Human
CL-0408NEC(人細胞)5×106cells/瓶×2
ANGPTL4 Others Human 人 ANGPTL4 人細胞裂解液 (陽性對照)
人脊髓星形膠質(zhì)細胞RNAHA-sp miRNA5 μg
MCF-7(OLD)細胞,人癌細胞 小鼠細胞,RenCa細胞 HL-02 [L-02,HL-7702], 正常人肝上皮細胞
MDA-MB-468(人癌細胞) 5×106cells/瓶×2
HUVEC Growth Medium 2single donor Pellet #N/A > 1 mio.cells 軟骨細胞培養(yǎng)基CM
TNFSF11 Protein Mouse 重組小鼠 RANKL / OPGL / TNFSF11 / CD254 蛋白 (Fc 標簽)
HAL-01 人急性混合型細胞
CD302 Others Mouse 小鼠 CD302 / CLEC13A 人細胞裂解液 (陽性對照)
HCT-8 [HRT-18]人回盲細胞 HCT-8 [HRT-18] human ileocecal carcinoma cells RPMI-1640(GIBCO)+10%FBS
SV40T轉(zhuǎn)化的人胚腎細胞;293T
人肺間充質(zhì)干細胞(肺)(HPMSC)(5×105) U251人細胞 Human
肉湯培養(yǎng)基250g用于測量磷細菌肥料中磷細菌的總數(shù)
Penicillin-Streptomycin-Glutamine" 含10000U青霉素,10000ug鏈霉素和29.2mg谷氨酰胺,保存:-5 - -20° 10378-016 100ml Penicillin-Streptomycin-Glutamine" 含10000U青霉素,10000ug鏈霉素和29.2mg谷氨酰胺,保存:-5 - -20° 10378-016 100ml
紅曲霉 食用 支/瓶
SalmonellaShigellaAgar
麥芽汁培養(yǎng)基 250g 用于霉菌和酵母菌增菌培養(yǎng)
肉湯培養(yǎng)基250g用于測量磷細菌肥料中磷細菌的總數(shù)
Penicillin-Streptomycin-Glutamine" 含10000U青霉素,10000ug鏈霉素和29.2mg谷氨酰胺,保存:-5 - -20° 10378-016 100ml Penicillin-Streptomycin-Glutamine" 含10000U青霉素,10000ug鏈霉素和29.2mg谷氨酰胺,保存:-5 - -20° 10378-016 100ml
紅曲霉 食用 支/瓶
SalmonellaShigellaAgar
麥芽汁培養(yǎng)基 250g 用于霉菌和酵母菌增菌培養(yǎng)
人,SPC-A1細胞規(guī)格李氏增菌肉湯基礎(chǔ)(LB)26040250g用于李斯特氏菌的選擇性增菌培養(yǎng)(GB4789.30-2010)。
C.L.E.D. 培養(yǎng)基 (CM0301) Oxoid incubation media C.L.E.D. 培養(yǎng)基 (CM0301) Oxoid
善變副球菌 支/瓶
平板計數(shù)肉湯(PCB)250g用于濾膜法計數(shù)菌落總數(shù)
BrothmediumG(MacConkeybroth)