產(chǎn)品名稱：人B細胞，RAMOS細胞說明書
規(guī)格 ：1 x 10^6 cells/T25培養(yǎng)瓶
細胞特性
1）來源：血液

2）形態(tài)：淋巴母細胞樣，懸浮生長

3）含量：>1x106 個/mL

4）污染：支原體、細菌、酵母和真菌檢測為陰性

5）規(guī)格：T25瓶或者1mL凍存管包裝

人B細胞，RAMOS細胞說明書細胞接受后的處理：
1）收到細胞后，請檢查是否漏液，如果漏液，請拍照片發(fā)給我們。
2）請先在顯微鏡下確認細胞生長狀態(tài)，去掉封口膜并將T25瓶置于37℃培養(yǎng)約2-3h。
3）棄去T25瓶中的培養(yǎng)基，添加6ml本公司附帶的完全培養(yǎng)基。
4）如果細胞長滿（90%以上）請及時進行細胞傳代，傳代培養(yǎng)用6ml本公司附帶的完全培養(yǎng)基。
5）接到細胞次日，請檢查細胞是否污染，若發(fā)現(xiàn)污染或疑似污染，請及時與我們?nèi)〉寐?lián)系。
細胞培養(yǎng)操作規(guī)程：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：

1） 準(zhǔn)備基礎(chǔ)培養(yǎng)基( GIBCO，，添加NaHCO3 1.5g/L，丙酮酸鈉 0.11g/L)；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。

2） 培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。溫度：37攝氏度，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3） 凍存液：90%完全培養(yǎng)基，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲存。

二． 細胞處理：

1） 復(fù)蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜（或?qū)⒓毎麘乙杭尤?/span>250px皿中，加入約8ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）。第二天換液并檢查細胞密度。

2） 細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。

對于貼壁細胞，傳代可參考以下方法：

1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。

2. 加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mMEDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。

3. 按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。

4. 將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

3）細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時，可進行細胞凍存。貼壁細胞凍存時，棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶，細胞變圓脫落后，加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中，再添加10%DMSO后進行凍存。
1.一般客戶拿到細胞后，應(yīng)該注意什么？
客戶收到細胞先不開蓋，放在培養(yǎng)箱靜置若干小時后（看細胞密度而定）在倒置顯微鏡下觀察細胞生長情況，并對細胞進行不同倍數(shù)拍照（建議受收細胞時的培養(yǎng)基拍一張照片，觀察培養(yǎng)基的顏色和是否有漏液情況，顯微鏡下拍細胞100X，200X各一張），排除細胞本身污染的情況；收到細胞未開封，出現(xiàn)污染狀況我們負責(zé)免費發(fā)送一株細胞。
收到細胞時如無異常情況，請在顯微鏡下觀察細胞密度，如為貼壁細胞，未超過80%匯合度時，將培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)液吸出，留下10ml培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng)；超過80%匯合度時，請按細胞培養(yǎng)條件傳代培養(yǎng)。如為懸浮細胞，吸出培養(yǎng)液、1000轉(zhuǎn)/分鐘離心2分鐘，吸出上清，管底細胞用新鮮培養(yǎng)基懸浮細胞后移回培養(yǎng)瓶。
CD40LG Protein Canine 重組狗 CD40L / CD154 / TNFSF5 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)

CNE-1 高分化細胞

CD96 Others Mouse 小鼠 CD96 人細胞裂解液 (陽性對照)

P9-EGFP-puro小鼠骨髓基質(zhì)細胞 P9-EGFP-puro mouse bone marrow somal cells 1640+10%FBS+1%P/S

小鼠成肌細胞;C2C12

人心肌細胞 (HCMa) (1×106 ) RGC-5, 小鼠視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細胞 Mouse
CL-0459U14(小鼠子細胞)5×106cells/瓶×2

CN3 Others Mouse 小鼠 Coactin 3 / CN3 人細胞裂解液 (陽性對照)

大鼠晶狀體上皮細胞完全培養(yǎng)基 100mL

EB (NBL-4)牛胚氣管細胞 EB (NBL-4) of bovine embryo acheal cells MEM培養(yǎng)基(GIBCO)+10%FBS

IL36G Protein Mouse 重組小鼠 IL36G / IL1F9 蛋白 (His 標(biāo)簽)

NCI-H446(人小細胞細胞) 5×106cells/瓶×2 HeLa(細胞)
CD40LG Protein Canine 重組狗 CD40L / CD154 / TNFSF5 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)

CNE-1 高分化細胞

CD96 Others Mouse 小鼠 CD96 人細胞裂解液 (陽性對照)

P9-EGFP-puro小鼠骨髓基質(zhì)細胞 P9-EGFP-puro mouse bone marrow somal cells 1640+10%FBS+1%P/S

小鼠成肌細胞;C2C12

人心肌細胞 (HCMa) (1×106 ) RGC-5, 小鼠視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細胞 Mouse
三糖鐵瓊脂(TSI)22080250g用于鑒別腸道菌發(fā)酵蔗糖、乳糖、葡萄糖及產(chǎn)生硫化氫的生化反應(yīng)

7521-prf MSCM-acf-prf 間充質(zhì)干細胞培養(yǎng)基 500 ml incubation media 7521-prf MSCM-acf-prf 間充質(zhì)干細胞培養(yǎng)基 500 ml

LactoseBileBroth

葡萄球菌增菌肉湯250g用于凝固酶陽性葡萄球菌的選擇性增菌

發(fā)光菌培養(yǎng)基 250g 用于發(fā)光菌的分離培養(yǎng)。
三聚氰胺標(biāo)準(zhǔn)品用于檢測*奶粉中三聚氰胺的含量。

T1N1瓊脂 T1N1 Agar 用于霍亂弧菌的培養(yǎng)(SN標(biāo)準(zhǔn))

酵母氮源-無氨基酸 YNB 100g BR

溶菌酶營養(yǎng)肉湯基礎(chǔ)250g/瓶用于蠟樣芽胞桿菌的溶菌酶試驗，每200ml培養(yǎng)基中加入incubationmedia溶菌酶營養(yǎng)肉湯基礎(chǔ)250g/瓶用于蠟樣芽胞桿菌的溶菌酶試驗，每200ml培養(yǎng)基中加入1209

營養(yǎng)肉湯(日本標(biāo)準(zhǔn)) 250g 用于一般細菌培養(yǎng)、轉(zhuǎn)種、復(fù)壯、增菌等
人B細胞，RAMOS細胞說明書大豆胨酵母浸粉瓊脂(PYE)250g用于真菌的選擇性分離培養(yǎng)

BPL瓊脂 250(g) incubation media BPL瓊脂 250(g)

1% NaC1甘露醇發(fā)酵管 1% NaC1甘露醇發(fā)酵管 20支 BR

玫瑰紅瓊脂250用于霉菌、酵母菌計數(shù)incubationmedia玫瑰紅瓊脂250用于霉菌、酵母菌計數(shù)

BoltomBrothAdditrive
人B細胞，RAMOS細胞說明書細胞出現(xiàn)問題，不予以重發(fā)的情況有哪些？
（1）客戶造成細胞污染，不重發(fā)；
（2）客戶不正確操作致細胞狀態(tài)不好，不重發(fā)；
（3）非推薦細胞培養(yǎng)體系致的細胞狀態(tài)不好，不重發(fā)；
（4）細胞狀態(tài)不好，未提供細胞培養(yǎng)前3天照片的，不重發(fā)；
（5）細胞培養(yǎng)時經(jīng)其它處理的，不重發(fā)；
（6）細胞收到2天內(nèi)，未告知，不重發(fā)；
（7）視具體情況而定。