![]() |
產(chǎn)地 | 進口、國產(chǎn) |
品牌 | 上海莼試 |
貨號 | CS-X0050 |
保存條件 | 低溫冷藏 |
英文名稱 | 1 x 10^6 cells/T25培養(yǎng)瓶 |
保質(zhì)期 | 詳見說明書個月 |
產(chǎn)品名稱:大鼠腎細胞,NRK-52E細胞規(guī)格
規(guī)格 :1 x 10^6 cells/T25培養(yǎng)瓶
細胞特性
1)來源:大鼠,正常腎
2)形態(tài):上皮細胞樣,貼壁生長
3)含量:>1x106 個/mL
4)污染:支原體、細菌、酵母和真菌檢測為陰性
5)規(guī)格:T25瓶或者1mL凍存管包裝
大鼠腎細胞,NRK-52E細胞規(guī)格細胞接受后的處理:
1)收到細胞后,請檢查是否漏液,如果漏液,請拍照片發(fā)給我們。
2)請先在顯微鏡下確認細胞生長狀態(tài),去掉封口膜并將T25瓶置于37℃培養(yǎng)約2-3h。
3)棄去T25瓶中的培養(yǎng)基,添加6ml本公司附帶的完全培養(yǎng)基。
4)如果細胞長滿(90%以上)請及時進行細胞傳代,傳代培養(yǎng)用6ml本公司附帶的完全培養(yǎng)基。
5)接到細胞次日,請檢查細胞是否污染,若發(fā)現(xiàn)污染或疑似污染,請及時與我們?nèi)〉寐?lián)系。
細胞培養(yǎng)操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備:
1)準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號21875-091),85%;馬血清10%,優(yōu)質(zhì)胎牛血清5%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:70%FBS,20%HS,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲存。
二.細胞處理:
1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜(或?qū)⒓毎麘乙杭尤?/span>10cm皿中,加入約8ml培養(yǎng)基,培養(yǎng)過夜)。第二天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。
1.棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2.加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3.按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4.將細胞懸液按1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3)細胞凍存:待細胞生長狀態(tài)良好時,可進行細胞凍存。下面T25瓶為類;
1,細胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后,PBS清洗一遍后加入1ml胰酶,細胞變圓脫落后,加入1ml含血清的培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計數(shù)板計數(shù)。
2,4min 1000rpm 離心去掉上清。加1ml血清重懸細胞,根據(jù)細胞數(shù)量加入血清和DMSO,輕輕混勻,DMSO終濃度為10%,細胞密度不低于1x10E6/ml,每支凍存管凍存1ml細胞懸液,注意凍存管做好標識。
3,將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80度冰箱,至少2個小時以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。
1.一般客戶拿到細胞后,應該注意什么?
客戶收到細胞先不開蓋,放在培養(yǎng)箱靜置若干小時后(看細胞密度而定)在倒置顯微鏡下觀察細胞生長情況,并對細胞進行不同倍數(shù)拍照(建議受收細胞時的培養(yǎng)基拍一張照片,觀察培養(yǎng)基的顏色和是否有漏液情況,顯微鏡下拍細胞100X,200X各一張),排除細胞本身污染的情況;收到細胞未開封,出現(xiàn)污染狀況我們負責免費發(fā)送一株細胞。
收到細胞時如無異常情況,請在顯微鏡下觀察細胞密度,如為貼壁細胞,未超過80%匯合度時,將培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)液吸出,留下10ml培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng);超過80%匯合度時,請按細胞培養(yǎng)條件傳代培養(yǎng)。如為懸浮細胞,吸出培養(yǎng)液、1000轉(zhuǎn)/分鐘離心2分鐘,吸出上清,管底細胞用新鮮培養(yǎng)基懸浮細胞后移回培養(yǎng)瓶。
大鼠腎細胞,NRK-52E細胞規(guī)格細胞出現(xiàn)問題,不予以重發(fā)的情況有哪些?
(1)客戶造成細胞污染,不重發(fā);
(2)客戶不正確操作致細胞狀態(tài)不好,不重發(fā);
(3)非推薦細胞培養(yǎng)體系致的細胞狀態(tài)不好,不重發(fā);
(4)細胞狀態(tài)不好,未提供細胞培養(yǎng)前3天照片的,不重發(fā);
(5)細胞培養(yǎng)時經(jīng)其它處理的,不重發(fā);
(6)細胞收到2天內(nèi),未告知,不重發(fā);
(7)視具體情況而定。
CL-0435SF126(人細胞)5×106cells/瓶×2
HA Others H12N1 甲型 H12N1 (A/mallard duck/Alberta/342/1983) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 人細胞裂解液 (陽性對照)
大鼠視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細胞完全培養(yǎng)基 100mL
HL-7702人正常肝細胞 HL-7702 human normal liver cell 1640+10% FBS
IL1RN Protein Rat 重組大鼠 IL-1RA / IL1RN 蛋白 (Fc 標簽)
NCI-H596(人肺腺鱗癌細胞) 5×106cells/瓶×2 cv-1(非洲綠猴腎細胞)
CL-0432RTE(大鼠氣管上皮細胞)5×106cells/瓶×2
IL23 Others Mouse 小鼠 IL-23 / IL23A & IL12B Heterodimer 人細胞裂解液 (陽性對照)
人腸微內(nèi)皮細胞RNAHIMEC miRNA5 μg
RBE細胞,人細胞 小鼠艾氏腹水瘤細胞,ECA細胞 人羊膜上皮細胞
M14(人細胞) 5×106cells/瓶×2
NHEK.f pooled Pellet 正常人表皮角質(zhì)細胞團塊(少年者,混合來源) > 1 mio.cells 內(nèi)皮細胞培養(yǎng)基ECM
KIT Others Human 人 KIT / c-KIT / CD117 (aa 540-972) 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照)
人小細胞;NCI-H2227
CM-R078大鼠大隱平滑肌細胞完全培養(yǎng)基100mL
Ishikawa, 人細胞系 胚肺細胞,2BS細胞 SNU-398(人細胞)
C3H/An小鼠結(jié)締組織細胞(L929-TK-);LTK-
TNFRSF19 Others Mouse 小鼠 TNFRSF19 / OY 人細胞裂解液 (陽性對照)
小鼠瘦素(LEP)ELISA試劑盒 ,英文名: LEP ELISA Kit
小鼠內(nèi)皮細胞生長因子受體2(VEGFR-2)ELISA檢測試劑盒MouseVascuoarendothelialcellgrowthfactorreceptor2,VEGFR-2ELISAkit 96T/48T
人高鐵血紅蛋白(MHB)免疫試劑盒 Human Methemoglobin,MHB ELISA Kit
RatGrowthHormoneReleasingPeptide,GHRPELISAKit大鼠生長激素釋放多肽(GHRP)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
BAX蛋白表達ELISA定量檢測試劑盒25次
Mouseinsulinaoaibodies,IAAELISA試劑盒小鼠自身抗體(IAA)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
豚鼠鉤端螺旋體IgG(Lebtospira)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
Human iercellular adhesion molecule 3 (ICAM-3/CD50) ELISA Kit 人細胞間粘附分子3(ICAM-3/CD50)ELISA試劑盒
humanβ2-microglobulin,BMG/β2-MGELISAKit 人β2微球蛋白(BMG/β2-MG)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝
HumanCyclicguanosinemonophosphate,cGMPELISA試劑盒人環(huán)磷酸鳥苷(cGMP)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
組織FGFR3激酶活性定量檢測試劑盒(A/B/C)20次
Humanprimaryhepaticcarcinoma,PHCELISAKit人抗原(PHC)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
大鼠腎細胞,NRK-52E細胞規(guī)格小鼠基質(zhì)金屬蛋白酶13(MMP-13)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
Rat soluble platelet endothelial cell adhesion molecule 1 (sPECAM-1/sCD31) ELISA Kit 大鼠可溶性血小板內(nèi)皮細胞粘附分子1(sPECAM-1/sCD31)ELISA試劑盒
HumanureaserelatedproteinC,UreCELISAKit 人尿素酶相關蛋白C(UreC)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝
Humanai-insulieceptoraibody,AIRAELISA試劑盒人抗受體抗體(AIRA)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
植物莽草酸脫氫酶(shikimatedehydrogenase;SkDH)電泳分析試劑盒5次
HumanVascularEndothelialcellGrowthFactorD,VEGF-DELISAKit人內(nèi)皮細胞生長因子D(VEGF-D)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T