兔牙周膜成纖維細(xì)胞接受后的處理：
1）收到細(xì)胞后，請(qǐng)檢查是否漏液，如果漏液，請(qǐng)拍照片發(fā)給我們。
2）請(qǐng)先在顯微鏡下確認(rèn)細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)，去掉封口膜并將T25瓶置于37℃培養(yǎng)約2-3h。
3）棄去T25瓶中的培養(yǎng)基，添加6ml本公司附帶的完全培養(yǎng)基。
4）如果細(xì)胞長(zhǎng)滿（90%以上）請(qǐng)及時(shí)進(jìn)行細(xì)胞傳代，傳代培養(yǎng)用6ml本公司附帶的完全培養(yǎng)基。
5）接到細(xì)胞次日，請(qǐng)檢查細(xì)胞是否污染，若發(fā)現(xiàn)污染或疑似污染，請(qǐng)及時(shí)與我們?nèi)〉寐?lián)系。
在確認(rèn)細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好且無污染后，接下來是細(xì)胞傳代的關(guān)鍵步驟。首先，準(zhǔn)備必要的實(shí)驗(yàn)器材，包括無菌的吸管、離心管、培養(yǎng)皿以及適量的PBS緩沖液和胰蛋白酶。確保所有器材都已消毒并置于無菌操作臺(tái)中。
6）進(jìn)行細(xì)胞傳代時(shí)，輕輕吸去T25瓶中的舊培養(yǎng)基，注意避免吸到細(xì)胞層。隨后，加入適量預(yù)熱的PBS緩沖液輕輕洗滌細(xì)胞表面，以去除殘留的血清和死細(xì)胞，洗滌兩次后棄去PBS。
7）緊接著，加入適量的胰蛋白酶（具體量根據(jù)細(xì)胞種類和密度調(diào)整），輕輕搖晃使胰酶均勻覆蓋細(xì)胞層，隨后將培養(yǎng)瓶放入37℃培養(yǎng)箱中消化約2-5分鐘，期間可輕輕拍打培養(yǎng)瓶壁幫助細(xì)胞脫落。待細(xì)胞變圓、間隙增大時(shí)，立即加入含血清的完全培養(yǎng)基終止消化。
8）使用吸管輕輕吹打細(xì)胞懸液，確保細(xì)胞完全分散成單個(gè)狀態(tài)。隨后，將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移至離心管中，以適宜的轉(zhuǎn)速（通常為1000-1500rpm）離心5分鐘，以去除胰酶和細(xì)胞碎片。
9）離心結(jié)束后，棄去上清液，加入適量的完全培養(yǎng)基重懸細(xì)胞。根據(jù)實(shí)驗(yàn)需要，可將細(xì)胞按一定比例（如1:2或1:3）接種到新的培養(yǎng)皿或培養(yǎng)瓶中，并輕輕搖晃使細(xì)胞均勻分布。最后，將培養(yǎng)皿或培養(yǎng)瓶置于37℃、含5% CO2的恒溫培養(yǎng)箱中繼續(xù)培養(yǎng)。
通過以上步驟，可以確保兔牙周膜成纖維細(xì)胞在傳代過程中保持活力并避免污染，為后續(xù)的實(shí)驗(yàn)研究提供高質(zhì)量的細(xì)胞樣本。
