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人MxA蛋白ELISA試劑盒操作流程

發(fā)表時(shí)間:2024-01-18
人MxA蛋白ELISA試劑盒操作流程如下:
1. 從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條,剩余板條用自封袋密封放回4℃。
2. 設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔,標(biāo)準(zhǔn)品孔各加不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)品50μL。樣本孔中加入待測(cè)樣本50μL??瞻卓撞患?。
3. 除空白孔外,標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶(HRP)標(biāo)記的檢測(cè)抗體100μL,用封板膜封住反應(yīng)孔,37℃水浴鍋孵育。
4. 洗板:扣去孔內(nèi)液體,300μL/well加入1×washing buffer。停留1分鐘后棄去孔內(nèi)液體。重復(fù)3次,每一次在濾紙上扣干。
5. 加樣:100μL/well加入稀釋后的Cytokine standard至標(biāo)準(zhǔn)品孔,100μL/well加入樣品至樣品孔,100μL/well加Dilution buffer R (1×)入空白對(duì)照孔?;靹蚝笊w上封板膜,室溫孵育。
6. 再次洗板:扣去孔內(nèi)液體,300μL/well加入1×washing buffer。停留1分鐘后棄去孔內(nèi)液體。重復(fù)5次,在濾紙上扣干。
7. 顯色:每孔加入顯色劑A、B各50μL,混勻,37℃孵育15-25分鐘,觀察到標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔顏色發(fā)生變化。
8. 終止反應(yīng):每孔加入終止液50μL,混勻。
9. 測(cè)量:用酶標(biāo)儀在450nm波長(zhǎng)處測(cè)量各孔的光密度值,記錄數(shù)據(jù)。
10. 根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)品和樣本的光密度值,按照試劑盒附帶的說明書進(jìn)行數(shù)據(jù)處理和結(jié)果分析。
注意事項(xiàng):
1. 操作時(shí)要嚴(yán)格遵守實(shí)驗(yàn)室安全規(guī)定和個(gè)人防護(hù)措施。
2. 在進(jìn)行試劑盒操作前,應(yīng)按照說明書要求徹底混合或管內(nèi)攪拌試劑。

3. 所有試劑和樣品均應(yīng)在4℃下儲(chǔ)存,并在使用前充分恢復(fù)到室溫。

在完成人MxA蛋白ELISA試劑盒的操作后,應(yīng)按照實(shí)驗(yàn)室安全規(guī)定正確處理廢棄物。同時(shí),為確保實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性,建議對(duì)每個(gè)樣本進(jìn)行多次檢測(cè)并取平均值。如有任何疑問或需要進(jìn)一步了解試劑盒的性能和注意事項(xiàng),建議查閱相關(guān)文獻(xiàn)或咨詢專業(yè)人士。

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