一、實驗原理
本試劑盒采用間接酶聯(lián)免疫吸附法測定人血清、血漿及相關液體樣本中的人II型膠原蛋白。用純化的抗人II型膠原蛋白抗體包被在酶標板上,樣本中的人II型膠原蛋白與已包被的抗體結(jié)合,再加入辣根過氧化物酶標記的抗人II型膠原蛋白抗體,形成免疫復合物。洗板后加入底物顯色,最后加終止液停止反應,用酶標儀在450nm波長測量各孔的OD值。通過標準品繪制標準曲線,計算樣本中人II型膠原蛋白濃度。
二、操作步驟
1. 準備:確保所有試劑和樣本達到室溫(20-25℃),準備好所有試劑和器材。
2. 加樣:在酶標板的適當位置分別加入標準品和樣本,每孔100μL。
3. 孵育:在37℃孵育1小時。
4. 洗滌:洗板5次,確保徹底洗凈。
5. 加酶標二抗:每孔加入100μL酶標二抗,在37℃孵育1小時。
6. 洗滌:再次洗板5次。
7. 顯色:每孔加入底物溶液,37℃孵育15-30分鐘。
8. 終止:每孔加入終止液,混勻。
9. 測定:用酶標儀在450nm波長測量各孔的OD值。
三、注意事項
1. 確保所有試劑和樣本達到室溫后再進行操作。
2. 加樣時避免產(chǎn)生氣泡。
3. 孵育和顯色過程中避免直射陽光。
4. 使用前請仔細閱讀說明書,并按照操作步驟進行。
以上是人II型膠原蛋白ELISA試劑盒的操作說明,僅供參考,具體操作請根據(jù)試劑盒說明書進行。如有任何疑問或需要更多幫助,請聯(lián)系試劑盒供應商或?qū)I(yè)人士。